細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。目前,細胞凍存的技術是液氮冷凍保存法,利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài),并保持細胞特性。通過冷凍方式保存細胞,可以在需要時進行復蘇及繼續(xù)培養(yǎng)。
最佳的冷凍條件是盡可能地降低細胞內(nèi)的晶體形成,減少細胞內(nèi)水凝固所形成的高濃度溶質對細胞造成的低溫損傷。除了我們知道的 緩慢冷凍,液氮低溫保存,快速復蘇外,凍存液的選擇也非常重要。
1 產(chǎn)品簡介
匯智和源無血清細胞凍存液,優(yōu)化了其配方組分,能夠更大程度的減少細胞在凍存、復蘇時的損傷。
本品不含血清,降低了DMSO的含量,屬于即用型細胞凍存液,無需配制,直接在細胞中加入適量的凍存液即可。對于PBMC細胞、干細胞或T淋巴細胞等細胞具有較好的保護能力,讓你輕松擁有高活率的細胞。
2 產(chǎn)品優(yōu)勢
成分:不含血清,降低了DMSO含量
高效:長期凍存后復蘇的細胞,仍然可以達到滿意的復蘇率
方便:即用型,無需額外配制
安全:無微生物污染風險,批次穩(wěn)定
3 凍存流程
1、凍存管、梯度凍存盒放進4℃冰箱提前預冷;
2、將要進行凍存的PBMC細胞、干細胞或T淋巴細胞等細胞, 350g 離心 7 分鐘,棄去上清并收集細胞。
3、加入?yún)R智和源無血清細胞凍存液,吸管輕輕吹打,重懸細胞。計數(shù)并調(diào)整細胞濃度;
4、將細胞懸液分裝于無菌凍存管中,每管加1mL細胞懸液,旋好凍存管并仔細檢查,一定要蓋緊,做好標記;
5、凍存:細胞放入梯度凍存盒,先在-20℃放1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜,再轉入液氮罐。
4 細胞凍存的注意事項
1、緩慢冷凍,細胞逐步脫水,不會因產(chǎn)生大的冰晶而受到損害
2、細胞在-20C冰箱內(nèi)放置時間不可超過1小時,以防止冰晶過大而破壞細胞。
3、保存在-80°C冰箱中的時間不要超過24h,放入液氮中保存;
4、凍存管的蓋子一定要擰緊,否則復蘇水浴時會滲水,造成支原體污染;
5、定期檢查液氮儲備,保證細胞全部浸在液面下。
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